Bakterie Salmonella i Shigella powodują lub przyczyniają się do chorób u ludzi, od ciężkiego zatrucia pokarmowego po zagrażający życiu dur brzuszny i raka pęcherzyka żółciowego. Obaj są członkami Światowej Organizacji Zdrowia Lista patogenów priorytetowych dla rozwoju nowych antybiotyków. Aby pomóc zwalczyć skutki tych bakterii, nasze laboratorium bada sposób, w jaki wytwarzają one maleńkie lipidy znane jako 3-fosfoinozytydy, aby przejąć kontrolę nad gospodarzem.
W jaki sposób fosfatazy mogą zwiększać poziomy fosfoinozytydów normalnie wytwarzanych przez kinazy? przez lata, uważają badacze że SopB i IpgD w jakiś sposób aktywowały kilka 3-kinaz fosfoinozytydowych lub PI3K. Blokowanie poszczególnych PI3K nie zmieniło funkcji efektorowej i produkcji PI3,4P2 i PI3,4,5P3. Zdolność do produkcji PI3, 4P2 i PI3,4,5P3 być nieodłącznym elementem SopB i IpgD? Na poparcie tego pomysłu autorzy wykazali, że do dimeryzacji PI4,5P wymagana jest katalityczna reszta cysteiny w miejscu aktywnym.2 i wytwarzają PI3,4P2/PI3,4,5P3.
SopB i IpgD są homologami ludzkich fosfodiesteraz, takich jak synaptoganina i INPP4B, które są spokrewnione z większą rodziną białkowych fosfataz tyrozynowych. Te fosfatazy zawierają aktywną resztę cysteiny, a jako część cyklu enzymatycznego istnieje półprodukt cysteinowo-fosforanowy, który następnie hydrolizuje. SopB i IpgD działają na powierzchnię błony, zwiększając prawdopodobieństwo, że inny lipid, a nie woda, zaatakuje pośrednią cysteinę-fosforan. W tym przypadku efektor będzie działał jak fosfotransferaza, a nie fosfataza.
Uzbrojony w tę przesłankę, pokazaliśmy Że SopB może generować PI3,4,5P3/ pi3,4p2 W probówce, gdy jest dostarczana tylko z PI4,5P2 jako podłoże. SopB jest wysoce aktywną fosfatazą; Mając wystarczająco dużo czasu, fosfoinozytydy są redukowane do PI i wolnego nieorganicznego fosforanu. Ponieważ PI3K są zbędne w komórkach ssaków, użyliśmy drożdży piekarskich, które naturalnie nie mają PI3K klasy I i II i pozostają żywe nawet wtedy, gdy jedyny PI3K klasy III jest inaktywowany. Kiedy wprowadziliśmy SopB do tych zmutowanych komórek drożdży, które zawierają obfite ilości PI4,5P2 Ale nie ma aktywności PI3K, PI3,4P2 został utworzony.
„Odkrywca. Entuzjasta muzyki. Fan kawy. Specjalista od sieci. Miłośnik zombie.”
More Stories
Nowy raport WHO pokazuje, jak miasta przyczyniają się do postępu w zapobieganiu chorobom niezakaźnym i urazom
Naukowcy identyfikują „najlepszy punkt” bezpiecznej operacji po zawale serca
Badanie wykazało, że 20% dzieci chorych na zapalenie płuc nie otrzymuje antybiotyków